پیپت ها تجهیزات آزمایشگاهی هستند که برای اندازه گیری و انتقال حجم بسیار کمی از مایعات استفاده می شوند. دقت در اندازه گیری پیپت بسیار مهم است زیرا تفاوت در حجم کاهش یافته توسط پیپت می تواند نتایج آزمایش را تحت تأثیر قرار دهد. برای اطمینان از دقت ، مهم است که کالیبراسیون پیپت را هر چند ماه یکبار بررسی کنید. فرآیند کالیبراسیون برای بررسی اینکه آیا این تجهیزات در حجم مناسب مایع می چکد مفید است ، بنابراین در صورت نیاز می توان تعمیرات را انجام داد.
گام
قسمت 1 از 2: بررسی کالیبراسیون
مرحله 1. مواد لازم را جمع آوری کنید
برای بررسی کالیبراسیون پیپت ، آنچه مورد نیاز است یک پیپت ، نوک پیپت ، آب مقطر ، لیوان ، دماسنج ، ترازو و فنجان توزین است. تراز مورد استفاده باید در مقیاس میکروگرم برای کالیبراسیون میکروپیپت با حداکثر مقدار 1 لیتر باشد.
- شما بیش از 5 میلی لیتر آب نیاز ندارید. لیوان را با آب پر کنید.
- مطمئن شوید که نوک پیپت درست است و محکم در پیپت قرار می گیرد.
مرحله 2. دمای آب مقطر را اندازه گیری کنید
دماسنج را در آب قرار دهید و بگذارید حداقل یک دقیقه بماند. اگر خط قرمز دماسنج هنوز در حال حرکت است ، یک دقیقه دیگر صبر کنید. بعد از یک دقیقه دما را ثبت کنید. بعد از اتمام کار دماسنج را بردارید و خشک کنید.
دانستن دمای آب مهم است ، زیرا از آن برای محاسبات انجام شده برای بررسی کالیبراسیون استفاده می شود
مرحله 3. فنجان وزن را روی ترازو قرار دهید و ترازو را صفر کنید
در حالت ایده آل ، تراز مورد استفاده دارای یک در و یک فضای عایق در داخل است. فنجان وزن را در محفظه تعادل قرار داده و درب را ببندید. اگر تراز شما دارای یک اتاقک و یک در نیست ، فقط یک فنجان وزن را روی ترازو بگذارید. دکمه "Zero" یا "Tare" را فشار دهید و منتظر بمانید تا مقیاس صفر شود.
صفر کردن مقیاس وزن لیوان پلاستیکی را کاهش می دهد و به شما امکان می دهد فقط وزن ماده ای را که در فنجان قرار داده شده وزن کنید
مرحله 4. پیپت را برای کالیبراسیون آماده کنید
قبل از شروع پیپت را با اتانول پاک کنید و مطمئن شوید هیچ چیزی نوک پیپت را مسدود نکرده است. نوک پیپت صحیح را به نوک پیپت وصل کنید و حجم مورد آزمایش را تعیین کنید.
برای کالیبراسیون ، کوچکترین و بزرگترین حجمهایی را که می توان از پیپت خارج کرد ، آزمایش کنید
مرحله 5. نوک پیپت را قبل از کالیبره کردن بشویید
دکمه را تا حد اول فشار دهید و نوک پیپت را در آب مقطر به عمق تقریبی 2 میلی متر فرو کنید. دکمه را رها کنید تا مقداری از مایع جذب شود و سپس با فشار دادن دکمه ، مایع را دوباره رها کنید. این مرحله را سه بار تکرار کنید تا نوک قطره چکان را قبل از استفاده بشویید.
دکمه را تا حد دوم فشار دهید تا مایع باقی مانده روی نوک پیپت برداشته شود ، سپس پیپت را از آب خارج کنید
مرحله 6. حجم کالیبراسیون را بکشید
در حالی که نوک پیپت خارج از آب مقطر قرار دارد ، دکمه را تا حد اول فشار دهید. نوک پیپت را به عمق 2 میلی متر در آب مقطر فرو کرده و دکمه را رها کنید تا مایع داخل نوک پیپت بکشد. حدود 1 ثانیه صبر کنید تا نوک قطره چکان را از آب خارج کنید.
اطمینان حاصل کنید که نوک پیپت در طول فرآیند آسپیراسیون به طور کامل غوطه ور شده است. نباید هیچ حبابی در نوک قطره چکان وجود داشته باشد یا نتیجه ممکن است اشتباه باشد
مرحله 7. مایع را در ظرف توزین روی ترازو بریزید
نوک پیپت را در انتهای جام توزین قرار دهید و سپس دکمه پیپت را تا حد اول فشار دهید. به نقطه دیگری ، کمی دورتر از آب بروید ، سپس دکمه را تا حد دوم فشار دهید. با فشار دادن دکمه ، نوک پیپت را از فنجان توزین بردارید.
نوک را به پیپت متصل کنید زیرا دوباره از آن برای آزمایشهای کالیبراسیون دیگر استفاده خواهید کرد
مرحله 8. وزن نشان داده شده در ترازو را ضبط کنید
اگر از ترازوی درب استفاده می کنید درب غرفه تعادل را ببندید. صبر کنید تا اعداد دیگر تغییر نکند. در دفترچه خود بنویس.
مهم است که منتظر بمانید تا اعداد روی مقیاس دوباره تغییر نکرده و آنها را یادداشت کنید. اگر منتظر نمانید یادداشت ها اشتباه می شوند
مرحله 9. این عمل را برای انجام خواندن حداقل 10 بار تکرار کنید
مقیاس را دوباره صفر کنید ، قبل از استفاده نوک پیپت را بشویید ، همان حجم مایع را بمکید ، حجم را بردارید ، سپس وزن را ثبت کنید. وزن آب مقطر را برای همان حجم ثبت کنید ، سپس تمام یادداشت های خود را متوسط کنید.
اگر هر جلد چندین بار آزمایش شده است ، می توانید این روند را برای حجم های مختلف تکرار کنید
قسمت 2 از 2: محاسبه نتیجه کالیبراسیون
مرحله 1. فرمول حجم محاسبه شده را تعریف کنید
فرمول محاسبه حجم مایع خارج شده توسط پیپت V = w * Z است ، w وزن آب است ، Z ضریب تبدیل بر اساس چگالی آب است ، در حالی که V حجم مقدار آب است حذف شده.
- متغیر Z را می توان با محاسبه چگالی آب با استفاده از دمای ثبت شده در ابتدای آزمایش به دست آورد.
- به عنوان مثال: اگر دمای آب 23 درجه سانتی گراد باشد ، مقدار Z 1.0035 گرم بر میلی گرم است.
مرحله 2. میانگین کلی کالیبراسیون پیپت را محاسبه کنید
حجم آب آزاد شده توسط پیپت حداقل ده بار وزن شده است. برای به دست آوردن میانگین همه این مقادیر ، همه آنها را با هم جمع کرده و بر 10 تقسیم کنید. اگر بیشتر یا کمتر این کار را انجام دادید ، نتایج کلی را جمع کنید و سپس بر تعداد آزمایشات انجام شده تقسیم کنید.
- به عنوان مثال: وزن آب حاصل از 10 آزمایشی که با پیپت 10μL انجام دادید به شرح زیر است: 9 ، 89 ، 10 ، 01 ، 10 ، 02 ، 9 ، 99 ، 9 ، 95 ، 10 ، 04 ، 9 ، 96 ، 10 ، 01 ، 9 ، 99 و 9 ، 98.
- میانگین: (9 ، 89 + 10 ، 01 + 10 ، 02 + 9 ، 99 + 9 ، 95+ 10 ، 04 + 9 ، 96 + 10 ، 01 + 9 ، 99 + 9 ، 98)/10 = 99 ، 84 /10 = 9،984
مرحله 3. متغیرها را به معادله وصل کرده و حل کنید
پس از تعیین عدد صحیح برای هر متغیر ، آن را به فرمول وصل کرده و حجم محاسبه شده را تکمیل کنید. برای حل این معادله ، فقط وزن متوسط همه آزمایشات را در مقدار Z ضرب کنید.
به عنوان مثال: V = w * Z = 9،984 * 1.0035 = 10 ، 019
مرحله 4. دقت پیپت را محاسبه کنید
از معادله A = 100 x V استفاده کنیدمیانگین/V0 برای محاسبه دقت پیپت A دقت پیپت را نشان می دهد ، Vمیانگین حجم متوسط محاسبه شده است و V0 مقدار تعیین شده روی پیپت است. مقدار دقت باید بین 99-101 باشد.
- اگر پیپت به درستی کالیبره شده باشد ، مقدار محاسبه شده باید بسیار نزدیک به مقدار واقعی تعیین شده در پیپت باشد.
- به عنوان مثال: A = 100 x Vمیانگین/V0 = 100 10 10 ، 019/10 = 100 1. 1.0019 = 100.19
- این پیپت به درستی کالیبره شده است.
مرحله 5. در صورت لزوم ، پیپت را برای کالیبراسیون ارسال کنید
اگر پیپت شما در آزمون کالیبراسیون موفق نشد ، در حال حاضر از آن برای آزمایش استفاده نکنید. پیپت ها تجهیزات آزمایشگاهی بسیار شکننده و گران قیمت هستند. شما نمی توانید کالیبراسیون را خودتان انجام دهید ، پیپت باید برای تعمیر ارسال شود. متناوبا ، چندین شرکت به آزمایشگاه شما می آیند و پیپت را در محل کالیبره می کنند.
