آیا تا به حال خواسته اید برای یک پروژه علمی یا فقط برای سرگرمی ، باکتری پرورش دهید؟ به نظر می رسد فوق العاده آسان است - همه آنچه شما نیاز دارید یک آگار مغذی (یک عنصر رشد ویژه مانند آگار) ، چند ظرف پتری استریل و برخی منابع منزجر کننده باکتری است!
گام
روش 1 از 3: تهیه ظرف پتری
مرحله 1. آگار را آماده کنید
آگار یک ماده ژله مانند است که برای پرورش باکتری ها استفاده می شود. این آگار از نوعی جلبک قرمز ساخته شده است که سطح محیطی رو به رشد را برای انواع مختلف باکتری ها فراهم می کند. برخی از انواع آگار حاوی مواد مغذی اضافی (مانند خون گوسفند) هستند که به رشد سریعتر باکتری ها کمک می کند.
- ساده ترین نوع آگار برای این آزمایش آگار مغذی است که به شکل پودر است. شما برای هر ظرف پتری 4 اینچی (10 سانتی متری) 1.2 گرم (حدود نیم قاشق چای خوری) پودر آگار نیاز دارید.
- در یک بشقاب یا کاسه ضد حرارت ، نصف قاشق چایخوری پودر آگار پودر شده را با 60 میلی لیتر (حدود 1/4 فنجان) آب داغ مخلوط کنید. با این حال ، این مقدار را در تعداد ظروف پتری که می خواهید استفاده کنید ضرب کنید.
- کاسه یا نعلبکی را در مایکروویو قرار دهید و یک دقیقه بجوشانید و مطمئن شوید که محلول سرریز نمی شود.
- وقتی محلول آماده شد ، پودر آگار باید کاملاً حل شده و مایع شفاف باشد.
- قبل از ادامه ، محلول آگار را چند دقیقه بگذارید سرد شود.
مرحله 2. ظرف پتری را آماده کنید
ظروف پتری ظروف کوچک با کف صاف ساخته شده از شیشه یا پلاستیک شفاف هستند. ظروف پتری دارای دو قسمت - بالا و پایین - هستند که به یکدیگر متصل شده اند. این امر محتویات فنجان را در برابر هوای ناخواسته آلوده محافظت می کند و در عین حال گازهای تولید شده توسط باکتری ها را نیز از بین می برد.
- ظروف پتری باید قبل از استفاده برای رشد باکتری ها کاملاً استریل شوند ، در غیر این صورت ممکن است نتایج آزمایش تحت تأثیر قرار گیرد. ظروف پتری تازه خریداری شده باید از قبل استریل شده و در یک ظرف پلاستیکی پوشانده شوند.
- ظرف پتری را از ظرف خارج کرده و دو نیمه را باز کنید. با دقت زیاد ، محلول گرم آگار را روی کف ظرف پتری بریزید - فقط به اندازه ای که یک لایه در کف ظرف ایجاد شود.
- به سرعت قسمت بالای پتری را بپوشانید تا از آلودگی آزمایش باکتری های موجود در هوا جلوگیری کنید. ظرف پتری را به مدت 30 دقیقه تا 2 ساعت نگه دارید تا محلول آگار سرد و سفت شود (در صورت آماده شدن محلول آگار شبیه Jell-O خواهد بود).
مرحله 3. ظرف پتری را در یخچال قرار دهید تا آماده استفاده شود
اگر قصد ندارید بلافاصله از ظروف پتری پر از آگار استفاده کنید ، آنها را باید در یخچال نگه دارید تا برای ادامه آزمایش آماده باشید.
- نگهداری ظرف پتری در یخچال از تبخیر آب ظرف جلوگیری می کند (باکتری ها برای رشد به محیط مرطوب نیاز دارند). همچنین اجازه می دهد تا سطح آگار کمی سفت شود ، که مانع از پاره شدن آن هنگام حرکت نمونه باکتریایی شما می شود.
- هنگام نگهداری ظروف پتری در یخچال ، باید آنها را وارونه قرار دهید. این مانع از تراکم روی درب می شود که ممکن است به پایین بیفتد و مانع رشد سطح شود.
- ظروف پتری پر از آگار را می توان چند ماه در یخچال نگهداری کرد. وقتی آماده استفاده هستید ، فنجان را از یخچال خارج کرده و اجازه دهید قبل از افزودن نمونه ، به دمای اتاق برسد.
روش 2 از 3: رشد باکتری ها
مرحله 1. باکتری ها را در یک ظرف پتری قرار دهید
هنگامی که محلول آگار سفت شد و پتری دیش در دمای اتاق قرار گرفت ، شما آماده قسمت سرگرم کننده - معرفی باکتری ها هستید. روشهای مختلفی برای انجام این کار وجود دارد - از طریق تماس مستقیم یا از طریق جمع آوری نمونه.
-
تماس مستقیم:
این کار زمانی انجام می شود که باکتری ها با استفاده از تماس مستقیم به عنوان مثال با لمس آگار به یک پتری دیش منتقل می شوند. یکی از روشهای متداول برای برقراری تماس مستقیم این است که به سادگی نوک انگشتان خود را (قبل یا بعد از شستن دست ها) به آرامی به سطح آگار فشار دهید. با این حال ، می توانید ناخن انگشتان خود یا سطح یک سکه قدیمی را روی آگار فشار دهید یا حتی یک تار موی نازک یا یک قطره شیر را داخل بشقاب بگذارید. از تخیلاتت استفاده کن!
- مجموعه نمونه: به این ترتیب ، می توانید تقریباً از هر سطحی باکتری ها را جمع آوری کرده و به یک ظرف پتری منتقل کنید ، تنها چیزی که نیاز دارید چند تکه پنبه تمیز است. فقط یک سواب پنبه ای بردارید و آن را روی هر سطحی که فکر می کنید پاک کنید - داخل دهان ، دستگیره در ، کلیدهای صفحه کلید رایانه یا کلیدهای ریموت - سپس آن را روی سطح آگار (بدون پاره شدن) پاک کنید. این لکه ها حاوی باکتری های زیادی هستند و باید در عرض چند روز نتایج جالب (و نفرت انگیز) تولید کنند.
- اگر دوست دارید ، می توانید بیش از یک نمونه باکتری را در هر ظرف پتری قرار دهید - تنها کاری که باید انجام دهید این است که ظرف را به چهار قسمت تقسیم کنید و یک نمونه متفاوت از باکتری ها را در هر طرف پاک کنید.
مرحله 2. نامی بگذارید و ظرف پتری را ببندید
پس از معرفی باکتری ها ، باید درب ظرف پتری را ببندید و آن را جدا کنید.
- حتماً نام هر بشقاب پتری را با منبع باکتری بگذارید ، در غیر این صورت نمی دانید از کدام باکتری آمده است. می توانید این کار را با نوار و نشانگر انجام دهید.
- به عنوان یک احتیاط دیگر ، می توانید هر ظرف پتری را در یک کیسه پلاستیکی استریل قرار دهید. این محافظت بیشتری در برابر کلنی های باکتریایی مضر که ممکن است ایجاد شود ، ایجاد می کند ، اما همچنان به شما امکان می دهد محتویات پتری دیش را مشاهده کنید.
مرحله 3. ظرف پتری را در یک مکان گرم و تاریک قرار دهید
ظرف پتری را در یک مکان گرم و تاریک ، جایی که باکتری ها بدون هیچ مزاحمتی می توانند رشد کنند ، برای چند روز بگذارید. به یاد داشته باشید که آن را به صورت وارونه ذخیره کنید ، به طوری که رشد باکتری ها در برابر قطرات آب بدون هیچ گونه اختلالی باقی می ماند.
- دمای ایده آل برای رشد باکتری ها بین 70 تا 98 درجه فارنهایت (20 تا 37 درجه سانتی گراد) است. در صورت نیاز ، می توانید پتری دیش را در جای خنک تری قرار دهید ، اما باکتری ها بسیار کندتر رشد می کنند.
- اجازه دهید باکتریها به مدت 4-6 روز رشد کنند ، زیرا این امر زمان کافی برای رشد کشت را فراهم می کند. هنگامی که باکتری ها شروع به رشد می کنند ، ممکن است متوجه بویی از پتری دیش شوید.
مرحله 4. نتایج خود را ثبت کنید
پس از چند روز ، انواع مختلف باکتری ها ، قارچ ها و قارچ ها را در هر پتری دیش می بینید.
- از یک دفترچه برای مشاهده مشاهدات خود از محتویات هر ظرف پتری استفاده کنید و شاید مکانهایی را که دارای بیشترین باکتری هستند ، استنباط کنید.
- در دهان شماست؟ دستگیره در؟ دکمه های ریموت شما؟ نتیجه ممکن است شما را شگفت زده کند!
- در صورت تمایل ، می توانید رشد روزانه کلنی های باکتریایی را با استفاده از نشانگر برای ردیابی یک دایره در اطراف هر کلنی در انتهای پتری دیش اندازه گیری کنید. پس از چند روز ، شما باید مجموعه ای از دایره های متحدالمرکز را در انتهای پتری دیش داشته باشید.
مرحله 5. اثربخشی عامل ضدباکتریایی را آزمایش کنید
یک تغییر جالب در این آزمایش قرار دادن یک عامل ضد باکتری (ضدعفونی کننده دست ، صابون و غیره) در یک ظرف پتری برای آزمایش اثربخشی آن است.
- پس از قرار دادن باکتری ها در پتری دیش ، از یک سواب پنبه برای قرار دادن یک قطره کوچک ژل ضدعفونی کننده دست ، صابون ضدعفونی کننده یا سفید کننده خانگی بر روی مرکز نمونه باکتری استفاده کنید ، سپس آزمایش را طبق معمول ادامه دهید.
- همانطور که باکتری های موجود در ظرف رشد می کنند ، یک حلقه یا "هاله" در اطراف محل قرار دادن عامل ضد باکتریایی که هیچ باکتری در آن در حال رشد نیست می بینید. این مکان به عنوان "منطقه روشن" (یا به طور دقیق تر "منطقه بازدارندگی") شناخته می شود.
- شما می توانید با مقایسه اندازه ناحیه شفاف در هر پتری دیش ، اثربخشی عوامل ضد باکتریایی مختلف را اندازه گیری کنید. هرچه منطقه روشن بیشتر باشد ، عامل ضد باکتری موثرتر است.
روش 3 از 3: با خیال راحت باکتری ها را از بین ببرید
مرحله 1. اقدامات احتیاطی مناسب را انجام دهید
قبل از اینکه بخواهید ظروف پتری خود را دور بیندازید ، ابتدا باید اقدامات احتیاطی مناسب را انجام دهید.
- در حالی که اکثر باکتری هایی که رشد می کنید بی ضرر هستند ، کلنی های بزرگ باکتری ها می توانند خطر بیشتری را ایجاد کنند - بنابراین قبل از دور ریختن آنها با سفید کننده خانگی ، ابتدا باید آنها را از بین ببرید.
- با پوشیدن دستکش لاستیکی از دستان خود در برابر سفید کننده ها محافظت کنید ، با عینک پلاستیکی آزمایشگاهی از چشم های خود محافظت کنید و با پوشیدن پیش بند از لباس های خود محافظت کنید.
مرحله 2. سفید کننده را در ظرف پتری بریزید
ظرف پتری را باز کنید و مقدار کمی سفید کننده را با دقت روی کلنی باکتری ها بریزید و ظرف را روی سینک نگه دارید. این باعث از بین رفتن باکتری ها می شود.
- مراقب باشید که سفید کننده به پوست شما برخورد نکند ، زیرا باعث سوختن پوست شما می شود.
- سپس ظرف پتری ضدعفونی شده را دوباره داخل پلاستیک استریل قرار داده و در سطل زباله بیندازید.
